细胞培养板的加样和操作时需要注意的事项

 

　　问：

　　96，24孔培养板或培养皿的盖子都很松，这样是方便了透气，但是细菌、霉菌等污染物会不会也随着溜进去呢？

　　答：

　　盖子很松，属于半开放培养，这样的目的是透气（实际上是为了使培养皿外的CO2能够与培养皿充分交换，维持培养基的pH值）。

　　凡事有利必有弊，这样当然增加了污染的可能性。此外这样还会使培养皿内的液体蒸发，这对于精确定量的药物来说就显得值得注意了。所以以下二条措施是必须的a培养箱内空气必须清洁（定期紫外线照，酒精擦洗，尽量少开关培养箱）b培养箱内的湿度必须始终保持为100%（培养箱内放置无菌蒸馏水的水槽）。

　　就好像培养皿，也是一个盖倒扣的容器，也不会污染。主要是因为盖子“L”型边缘产生气流负压的缘故，灰尘上面才附着有微生物，而气流携带的灰尘是无法通过产生负压的盖边缘的。而透气作用只是通过空气的扩散，不会产生气流，所以只会透气不会透菌。

 

　　问：

　　使用24孔板，在其中的某些孔中有操作(在超净台内)，而其他孔中还有细胞要培养.我很担心这样会污染，不知道要注意什么?

　　答：

　　在超净台内如果操作规范的话应该可以的，我想你可以充分利用培养版的盖子，尽量只暴露要操作的孔，将其他孔用盖子盖起来。

　　使用前综合考虑一下，充分使用所有的孔；如果只需要使用少数的孔可以只用一边的，其余用盖子盖住，习惯于先用右侧的孔（右手加样方便）。

　　细胞培养板操作时用几块玻片把板子一侧垫高，不要把盖子全打开，一般没问题。